Acta Tropica 36, 181-191 (1979) Institut de Zoologie, Université de Neuchâtel, Suisse Aspects nouveaux du rôle de vecteur joué par Ixodes ricinus L. en Suisse1 Note préliminaire A. Aeschlimann2, W. Burgdorfer3, H. Matile4, O. Peter2, R. Wyler4 Summary Title: New aspects of the part of the vector played by Ixodes ricinus L. in Switzerland. Preliminary note The authors, after having recalled their recent work on Ixodes ricinus ecology, give the new results about the part played by this species in the trans- mission of different infectious agents in Switzerland. I. ricinus was already known to be the most important vector of the tick borne encephalitis virus, and of protozoans of the Babesia genus. In this article, we describe the existence in the hemolymphe of different I. ricinus populations, of a rickettsia species relat- ed to the RMST group (Rocky-Mountain Spotted Fever), of a trypanosome, which is close to T. theileri, and of an infectious larval form (L3) of Dipetalo- nema rugosicauda. An outline is suggested with the object of illustrating the functioning of a natural foci of tick encephalitis. The biological significance of the unusual presence of trypanosomes and of larval filariae in ticks is also dis- cussed. The authors underline the fact that rickettsia, trypanosomes and filarial forms are observed for the first time in Swiss I. ricinus. Key words: Ixodes ricinus; tick borne encephalitis; rickettsia; trypano- somes; filariae. 1 Travail effectué avec l'aide du Fonds National Suisse pour la Recherche Scientifique, Requête No. 3.303.78 2 Institut de Zoologie, Neuchâtel 3 Rocky Mountain Laboratory, Hamilton, Montana USA 4 Institut de Virologie, Zurich Correspondance: Prof. Dr A. Aeschlimann, Institut de Zoologie, Université de Neuchâtel, CH-2000 Neuchâtel 7 181 Introduction Dans un précédent travail, et exprimé dans son sens très général, nous posions la question de savoir si les tiques de Suisse transmettaient des agents pathogènes (Aeschlimann et al., 1969). Depuis lors, l'inventaire des espèces d'Ixodoïdes récoltés en Suisse a été établi. Il ressort de cette étude qu'Ixodes ricinus est la tique la plus répandue. Elle colonise tous les milieux où la végéta- tion offre les conditions microclimatiques nécessaires à sa sur-vie. On la trouvera donc dans des biotopes où le couvert végétal est abondant: forêts à riche sous- bois, bosquets, buissons, haies, etc. I. ricinus est rare dans les pâturages à ciel ouvert; il disparaît dans les champs cultivés; sa limite de distribution en altitude ne dépasse guère 1200 m (Aeschlimann, 1972). L'espèce s'accommode d'hôtes aussi divers que les reptiles, les oiseaux et les mammifères les plus variés. En 1969, à la suite des résultats d'études entreprises dans les pays limi- trophes, on pouvait admettre qu7. ricinus, en Suisse aussi, jouait un rôle dans la transmission d'agents pathogènes, particulièrement du virus de l'encéphalite à tiques (Frühsommer-Meningoenzephalitis: FSME) et des babésies. Nous avons donc élaboré un programme de recherches destiné à démontrer qu'/. ricinus est porteur de tels agents pathogènes. Les observations enregistrées à ce jour laissent supposer qu'/. ricinus joue également un rôle important dans l'épidé- miologie d'autres microorganismes que ceux évoqués ci-dessus. Aussi, cet ar- ticle est-il destiné à présenter nos premiers résultats et à les comparer avec les données de la littérature. Virus à tiques (FSME) En 1969 déjà, Krech et al. ainsi que Spiess et al. ont rapporté quelques cas cliniques et sérologiques de FSME. Cependant, c'est en 1972 seulement que le virus est isolé par Wandeler et al., mais à partir du cerveau d'un chien. En 1973, Wandeler et al. récolte le sérum de carnivores sauvages: 91 des 560 séra exami- nés présentent des anticorps contre le virus FSME. Enfin, Wyler et al., toujours en 1973, isole pour la première fois le virus à partir de tiques récoltées sur la végétation dans la région de Schaffhouse (voir aussi Schmidtke, 1973 et Radda et al., 1974). Depuis lors, des anticorps FSME ont été mis en évidence dans des séra humains provenant des régions de Schaffhouse, Winterthour, Thoune et Neuchâtel (Munzinger et al., 1977). L'un des auteurs du présent article5 a d'autre part isolé une souche de virus FSME à partir d'un Apodemus flavicolis et des anticorps ont été reprérés dans le sang de 4 autres rongeurs ( 1 Clethrionomys glareolus et 3 Microtus agrestis). Ces mammifères provenaient de la région de Thoune (Zwieselberg). L'ensemble des résultats évoqués ci-dessus démontre que le virus FSME est installé en Suisse dans divers foyers, par ailleurs écologiquement caractéris- 5 Certains des résultats présentés dans ce chapitre font l'objet de la thèse de H. Matile. 182 . ST Mill O a, * SSlI IW I •3 rése § .2 C Tt g 1- M K .ß C 3 i: 3 .(U ¾ i« — U =3 fc- OO "S ^. y 4> S C im iîifi Ulti liiii ? ils tiques pour /. ricinus. Tout laisse supposer que cette tique est le vecteur et assure la transmission du virus à l'homme, à des animaux domestiques (chien) et à des animaux sauvages (carnivores, rongeurs). Comme les carnivores et les rongeurs sont également les hôtes d'autres tiques du genre Ixodes (I. hexagonus pour les premiers et /. trianguliceps pour les seconds), on ne doit pas négliger le rôle possible que ces espèces endophiles pourraient jouer dans la circulation du virus dans la nature. La Fig. I et sa légende renseigne le lecteur sur notre hypothèse de travail. D'autres travaux sont donc indispensables pour mieux comprendre la distribu- tion et l'écologie de ce virus dans les conditions suisses. Il faut cependant souli- gner que si nos connaissances à ce sujet restent encore minces, c'est que l'encé- phalite à tiques n'apparaît toujours pas, dans notre pays, comme une maladie aussi importante qu'en Europe centrale. Rickettsies 1. Coxiella burnetii. La «Q-fever» est la seule rickettsiose connue en Suisse. Encore l'histoire naturelle de ce microorganisme n'a-t-elle pas été étudiée. En principe, tous les cas humains signalés (environ 120 cas par année) sont dus à la manipulation d'animaux domestiques infectés (bovins, ovins, caprins). En effet, l'infection se fait par aérosol et il est inutile de rappeler ici la très grande résis- tance de Coxiella burnetii aux conditions externes défavorables. La rickettsie survit donc pour de longues périodes dans le milieu ambiant, permettant la résurgeance brutale et accidentelle de l'infection chez l'homme alors que la source primaire (les animaux domestiques infestés) a été éloignée depuis long- temps. Cependant, la présence de C. burnetii a été démontrée dans Dermacentor reticulatus en Allemagne voisine (Liebisch et al., 1978). Brassard et Aeschli- mann (1976) ont d'autre part obtenu une souche de cette rickettsie à partir du rongeur Clethrionomys glareolus et ont réussi son passage par /. ricinus. On peut donc concevoir pour C. burnetii, moyennant quelques modifications, un cycle naturel en Suisse comparable à celui envisagé pour le virus FSME. Ceci reste évidemment à démontrer (Fig. I). 2. Autres microorganismes de la famille des Rickettsias. D'autres microorga- nismes de «type rickettsien» ont pu être mis en évidence dans /. ricinus, comme le démontre le Tableau 1 et la Fig. 2. En fait, selon le biotope où les tiques ont été capturées, le pourcentage d'infection d'I. ricinus par des agents rickettsiens varie de 1,8-11,7%6. L'identification de ces microorganismes n'a pas encore été établie mais, par immunofluorescence directe, une parenté avec les rickettsies de la fièvre pour- prée des Montagnes Rocheuses a été démontrée. Nous n'oublions pas que 6 Certains des résultats présentés dans ce chapitre font l'objet de la thèse d'O. Peter. 184 Tableau 1. Présence de microorganismes de type rickettsien dans les Tiques Ixodes ricinus capturées sur la végétation de plusieurs Tégions de Suisse Lieu Nombre de tiques Nombre de tiques % examinées positives Bois d'Hôpital NE Staatswald BE ... LeChablaisBE .. Seewald BE...... Schachenwald ZG Sins AG......... Kappet ZH...... Winzwilen ZG ... Chamauwald ZG . Totaux....................... 4104 344 8.3 NN = Résultats basés sur l'étude de frottis des tissus de nymphes oo I — Résultats basés sur l'étude de l'hémolymphe des tiques adultes d'autres collègues (Rehacek et al., 1976) ont décrit, sous le nom de R. slovaca, une rickettsie observée dans D. marginatus. Bien entendu, rien n'est connu sur l'éventuelle pathogénicité des rickettsies que nous avons trouvées dans les /. ricinus de Suisse. On pourrait supposer que les rongeurs leur servent de réser- voirs. Protozoaires 1. Babésies. Nous avons publié ailleurs quelques réflexions sur les babésies de Suisse (Aeschlimann et al., 1975). Nous n'y reviendrons que pour mémoire, afin de rappeler que les rongeurs (Apodemus sylvaticus cxflavicolis, Clethriono- mys glareolus et Microtus arvalis) hébergent régulièrement ces hématozoaires. Aucun essai de transmission par les tiques inféodées à ces rongeurs (immatures 11 NN 3 ! 131(J(J 8 f 179 ÎÎ 5 520NN 38 I 421.J(J 27 I 903 îî 88 230 SS 19 Ì 420 îî 41 273NN 27 I 116 55 15 f 411 îî 53 34NN 2 1 ! 96 35 9 123 îî 6 57 55 1 ! 65 îî 1 9 55 1 Ì 4ÏÎ 5SS 4(J *• Fig. 3. "Swiss agent" rickettsia in tunica vaginalis of hficrotus pennsvlrannus (Giméncz slain L.900X). Fig. 4. Massive growth of the "Swiss agent" in a cell line of tunica vaginalis from M. pennsyhamcus Iüimène?-slain, 1.90Ox). 362 Fig. 5. Electromicrograph of the "Swiss agenl" in Malpighian tubule tissue of engorged nymphal I. ricinus (26.30Ox). Fig. 6. Indirect fluorescent antibody reaction of the "Swiss agent" with convalescent serum from ,1 person affected with Rocky Mountain spotted fever (1.100x ). 363 Table 2. Identification of the "Swiss agent" in MIF-cross tests of mouse sera* Antisera Antigens Swiss agent R. rickellsii R. conorii R. shvaca R. sibirica (HO)" (35) (51) (81) (3) "Swiss agent" (110) .. 128*»* 0 0 0 0 R. rickellsii (35) ..... 0 128 0 32 16 R. «morii(5Ì)....... 0 tr**** 128 32 32 R. i/»wm(81)....... 0 16 32 256 128 R. sibirica (3)........ 0 64 64 512 512 * Results with additional antigens cited in the text were similar to those tabulated here. ** Figures in parentheses denote code numbers of rickettsial strains. *** serum dilution endpoint **** trace of reaction at 1:8 dilution Table 3. Spotted fever group relationship of "Swiss agent" by direct FA staining Antigens "Swiss agent" conjugate 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 + + + + + + + + + ( + ) + + + ( + ) + + + ( + ) + + + ( + ) + + ( + ) + + (+) + (+) "Swiss agent" ( 110)......... + + + + + + + (+) R. rickellsii (35)............ R. montana (9)............. R. sibirica (3).............. R. shvaca (81)............. R. akari(%)................ R. conorii (51) ............. R. rhipkephali ( 12) ......... + = good fluorescence ( + ) = weak fluorescence meadow voles immunized by inoculation with infected tick suspensions reacted with several prototypes of spotted fever group rickettsiae (Table 3). Specific reactions against the "Swiss agent" were obtained only after 32-fold dilution of the preparation. Antigenic relatedness to the spotted fever group rickettsiae was also shown in the indirect FA test. Human immune sera to R. rickettsii reacted strongly with the "Swiss agent", as illustrated in Fig. 6. Discussion The presence of spotted fever group rickettsiae in I. ricinus has been report- ed from several European countries. Giroud et al. (1962) noted rickettsialike 364 microorganisms in four pools of this tick taken off domestic animals in the eastern part of France. They identified them serologically as R. conorii. In a subsequent survey in various parts of that country, 33 of 71 pools of /. ricinus contained morphologically typical or atypical rickettsiae that could not readily be adapted to chick embryos or other laboratory animals. However, sera of animals inoculated with these rickettsiae, had antibodies against R. conorii, C. burnetii, and the psittacosis group agents (Giroud et al., 1965). Additional evidence of spotted fever group rickettsiae (R. conorii) in I. hexagonus, Der- macentor reticulatus, and D. marginatus from southeastern parts of France was reported by Gilot (1975). During extensive investigations on tick-borne rickettsioses in various parts of Slovakia from 1968-1974, and more recently in south Bohemia, Rehaòek and associates (1972; 1975; 1976a; 1976b; 1977) examined 4,441 adult/, ricinusby the hemolymph test and found 171 infected with rickettsiae. Most were identi- fied serologically of by direct immunofluorescence as members of the spotted fever group. No characterization of these organisms was reported. In the 1968 — 1970 study, Rehäöek et al., (1972) obtained 3 rickettsial isolates in chick em- bryos. They multiplied poorly but killed the embryos in 3 to 4 days after inocu- lation. Guinea pigs were said to respond only exceptionally with short and weak febrile reactions. There was moderate scrotal involvement, but this manifesta- tion was seen also in guinea pigs without fever. Recent tick/rickettsial surveys in Bulgaria revealed extremely high (up to 52.2%) percentages of I. ricinus infected with spotted fever group rickettsiae (Georgieva et al., 1976; Georgieva and Kyossev, 1978). These findings were based on positive hemolymph tests and on subsequent identification of the rickettsiae by direct immunofluorescence. Guinea pigs inoculated with suspen- sions of 5 infected adult I. ricinus responded in at least 4 instances with CF antibodies to spotted fever group antigens. Thus, rickettsiae detected so far in I. ricinus and in many other species of European ticks (see references cited) have been identified in preliminary ways only by serologic tests and/or immunofluorescence. Their precise antigenic relation to the prototype strains of tick-borne rickettsiae remains to be estab- lished. An exception to this is a spotted fever group agent isolated from D. mar- ginatus in Slovakia (Brezina et al., 1968). When subjected to serologic tests, this organism was found to differ so much from other prototype species of the spot- ted fever group that it was considered a new species, for which the name, R. slo- vaca, was proposed (Urvölgyi and Brezina, 1978). The "Swiss agent" also appears to be a hitherto undescribed member of the spotted fever group. Its antigenic relationship to this group is indicated by cross reactions in direct and indirect immunofluorescent staining. Also typical for spotted fever group rickettsiae is its growth pattern in the tick vector in which it produces generalized infection, its ability to invade and multiply in nuclei, and its transmission via eggs to the progeny. 365 Serologically, at least in MA and MIF tests, the "Swiss agent" is quite distinct in that it does not cross-react with any of the prototypes of spotted fever group rickettsiae. In spite of these rather unique biological characteristics, we do not now propose a scientific name for the "Swiss agent". This must await results of experiments in progress to determine the guanine plus cytosine com- position of the rickettsia's DNA, its protein patterns by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, its antibiotic sensitivity, and the immune responses of laborato- ry animals as measured by other serologic tests. Also underway are investiga- tions pertaining to the ecology of this tick-borne agent as well as its potential significance as a pathogen for man. Lastly, it should be noted that none of the 3,165 adult I. ricinus examined was infected with C. burnetii, although all these ticks originated from areas where human cases of Q fever occurred in association with the livestock indus- try. Detection of natural foci of this agent would not be surprising in view of reports from Slovakia (Rehaòek et al., 1970; 1975), Austria (Kaaserer et al, 1976), and Bulgaria (Georgieva et al., 1976; Georgieva and Kyossev, 1978) where / ricinus and other species of ixodid ticks were found to be infected with C. burnetii. 1 Aeschlimann A.. Burgdorfer W., Matile H.. Peter O., Wyler R.: Aspects nouveaux du rôle de vecteur joué par Ixodes ricinus L. en Suisse. Note préliminaire. Acta trop. (Basel) 36, 181 (1979). 2 Bazlikova M., Kaaserer B., Brezina R., Kovâcovà E., Kaaserer G.: Isolierungen von Rickettsien der Spotted-Fever-Gruppe (SF-Gruppe) aus Dermacenlor marginatus-Zecken aus Tirol. Öster- reich. Immunität u. Infektion 5, 167 (1977). 3 Brezina R., RehâCek J., Ai P., Majerskâ M.: Two strains of rickettsiae of Rocky Mountain spotted fever group recovered from Dermacenlor marginaux ticks in Czechoslovakia. Results of preliminary serological identification. Acta virol. 13, 142 (1968). 4 Burgdorfer W.: Hemolymph lest. A technique for detection of rickettsiae in ticks. Amer. J. trop. Med. Hyg. 19, 1010(1970). 5 Cory J., Yunker C. E., Ormsbee R. A., Peacock M.. Meibos H.. Tallent G.: Plaque assay of rickettsiae in a mammalian cell line. Appi. Microbiol. 27, 1157 (1974). 6 Fiset P., Ormsbee R. A., Silberman R., Peacock M., Spielman S. H.: A microagglutination technique for detection and measurement of rickettsial antibodies. Acta virol. 13, 60 ( 1969). 7 Georgieva G., Kyossev B.: Comparative analysis and evaluation of the various kinds of ixodic ticks as carriers of rickettsiae in Bulgaria. VII. Int. Congr. Infectious and Parasitic Dis., Varna. Bulgaria, Oct. 2-6. 1978, Report I, p. 515. 8 Georgieva G., Serbezov V., Alexandrov E.: Investigation on some ixodic ticks for infestation with rickettsiae by means of immunofluorescent hemocytic test. 2. Int. Arbeitskolloquium über «Naturherde von Infektionskrankheiten in Zentraleuropa». Graz, 25.-28. Febr. 1976 (ed. by W. Sixl and H. Troger. Graz), p. 317. 9 Gilot B.: Recherches des rickettsies hébergées par les tiques (Acariens; Ixodoidea) du Sud-Est de la France. Premier bilan. Contexte écologique de rencontre avec l'homme. Bull. Soc. Path. exot. 68, 529 (1975). 10 Giménez D. F.: Staining rickettsiae in yolk-sac cultures. Stain Technol. 39. 135 (1964). 11 Giroud P.. Capponi M.. Dumas N.. Rageau J.: Les Ixodes ricinus et hexagonus de France contiennent des agents rickettsiens ou proches. CR. Acad. Sci. Paris 260. 4874 ( 1965). 366 12 Giroud P., Capponi M., Dumas N., Colas Belcour J., Masson R.: Mise en évidence d'une façon presque constante sur des tiques de l'Est de la France de l'antigène du groupe boutonneux pourpré et isolement de souches. CR. Acad. Sci. Paris 255, 611 (1962). 13 Hayes S. F., Burgdorfer W.: Ultrastructure of Rickettsia rhipicephali, a new member of the Spotted Fever group rickettsiae in tissues of the host vector Rhipicephalus sanguineus. J. Bact. /57.605(1979). 14 Kaaserer B., Kaaserer G., Sixl W., Stiinzner D.: Q-Fieber-Untersuchungen in Tirol. 2. Int. Arbeitskolloquium über «Naturherde von Infektionskrankheiten in Zentraleuropa». Graz, 25.- 28. Febr. 1976 (ed. by W. Sixl and H. Troger, Graz), p. 331. 15 Liebisch A.: Das Q-Fieber als Naturherdinfektion in Süddeutschland. Bundesgesundheitsblatt 20, 185(1977). 16 Liebisch A., Burgdorfer W., Rahman M. S.: Epidemiologische Untersuchungen an Schafzecken (Dermacentor marginatus). Dtsch. tierärztl. Wschr. 85, 121 (1978). 17 Philip R. N., Casper E. A., Burgdorfer W., Gerloff R. K., Hughes L. E.. Bell E. J.: Serologie typing of rickettsiae of the spotted fever group by microimmunofluorescence. J. Immunol. 121. 1961(1978). 18 Rehâêek J., Kovâoovâ E., Kovâé P.: Rickettsiae belonging to the spotted fever group from ticks in the Tribeê mountains. Folia parasit. (Praha) 23, 69 (1976a). 19 Rehâéek J., Liebisch A., Urvölgyi J.. Kovâfovâ E. : Rickettsiae of the spotted fever isolated from Dermacentor marginatus in South Germany. ZbI. Bakt. Hyg. L. Abt. Orig. A. 239, 275 ( 1977). 20 Rehâcek J., Ai P., Brezina R., Majerskâ M.: Q fever investigation in Slovakia. I. Isolation of the agent from ticks and serological surveys in small mammals in the districts of Zvolen and Luêe- nec, Central Slovakia Region. J. Hyg. Epidemiol. (Praha) 14, 230 ( 1970). 21 Rehâôek J., Brezina R., Ai P., Zupanêiêovâ M., Kovâéovâ E.: Contribution to the natural focality of rickettsiae belonging to the Rocky Mountain spotted fever (RMSF) group in Slova- kia. Folia parasit. (Praha) 19, 41 (1972). 22 RehaCek J., Palanova A., Zupanuiêovâ M., Urvölgyi J., Kovâêovâ E., Jarâbek L.. Brezina R.: Study of rickettsioses in Slovakia. I. Coxiella burneli and rickettsiae of the spotted fever (SF) group in ticks and serological surveys in animals and humans in certain selected localities in the Lucenec and V. Krtiä districts. J. Hyg. Epidemiol. (Praha) 19, 105 ( 1975). 23 RehaCek J., Voäta J., Taraseviê I. V., Brezina R., Jablonskaja V. A., Plotnikova L. F., Fetisova N. F., Hanâk P.: Rickettsioses studies. 3. Natural foci of rickettsioses in south Bohemia. Bull. WHO 55,455(1977). 24 Rehâéek J., Zupanéijova M., At P., Brezina R., Urvölgyi J.. Kovâiovâ E.. TaraseviC I. V.. Jablonskaja V. A., Pospisïl R., Baloghova D.: Rickettsioses studies. 2. Natural foci of rickett- sioses in east Slovakia. Bull. WHO 53, 31 (1976b). 25 Urvölgyi J., Brezina R.: Rickettsia slovaca: A new member of spotted fever group rickettsiae. In: Rickettsiae and rickettsial diseases. Proc. 2. Int. Symp. Rickettsiae and Rickettsial Diseases. Smolenice, Czechoslovakia, 1976, p. 299. VEDA, Bratislava 1978. 367 -' ' ? -) Separatdruck aus 461 Schweiz. Arch. Tierheilk. 127, 461-468, 1985 Institut de Zoologie de l'Université de Neuchâtel Présence d'anticorps contre la «Rickettsie suisse» chez les mammifères sauvages et domestiques du Canton de Neuchâtel1 O. Péter2 Introduction La tique Ixodes ricinus est un vecteur des rickettsies connu en Europe depuis de nombreuses années. Les chercheurs de plusieurs pays ont en effet décelé une rickettsie du groupe de la fièvre pourprée dans cet ectoparasite (France: Giroudet al, 1962,1965; Belgique: Jadin et Giroud, 1966; Tchécoslovaquie: Rehâcek et ai, 1972, 1976a, 1976b, 1977; Bulgarie: Georgieva et ai, 1976). En 1979, on a démontré, pour la première fois en Suisse, la présence d'une rickettsie chez la tique /. ricinus (Aeschlimann et al, 1979). Son isolement et son identification ont révélé qu'il s'agissait probablement d'une nouvelle rickettsie du groupe de la fièvre pourprée (Burgdorfer et al, 1979). En Suisse, la distribution géographique d'I. ricinus est limitée par l'altitude (Aeschlimann, 1972). En effet, au-dessus de 900 à 1000 m, la densité des populations de ce vecteur diminue rapidement. Nous avons donc entrepris une enquête sérologique dans un double but: 1. Connaître les mammifères impliqués dans la circulation de cette rickettsie. 2. Mettre en relation la distribution supposée d'/. ricinus et les cas sérologiquement po- sitifs. Matériels et méthodes 1. Captures et récoltes de sang Nous avons capturé des micromammifères vivants à l'aide de trappes tchèques dans des lieux si- tués à des altitudes différentes (4 biotopes au-dessous de 600 m, 2 biotopes entre 700 et 800 m et 1 bio- tope au-dessus de 1000 m). Le prélèvement de sang des micromammifères a été effectué par ponction rétroorbitale. En outre, la récolte de sang des grands mammifères sauvages a nécessité la collaboration de l'Inspecteur de la chasse et de la pêche, des gardes-chasse et des chasseurs du Canton de Neuchâtel. Le sang est collecté dans la cavité thoracique des animaux abattus. Nous avons également profité de prélèvements de sang effectués par l'Office Vétérinaire Cantonal sur les bovins pour recueillir des échantillons de sera. 2. Techniques sérologiques Les sera de tous les animaux ont été testés par microagglutination (Fiset et ai, 1969). L'antigène3 employé provenait d'un isolement de la «rickettsie suisse» à partir d'I. ricinus (Burgdorfer et ai, 1979). Nous avons fixé le seuil de spécificité à 1/8. 1 Ce travail présente des résultats qui font partie de la thèse de l'auteur. 2 Adresse: Institut de Zoologie, Université de Neuchâtel, Chantemerle 22, CH-2000 Neuchâtel 7 3 fourni par le Rocky Mountain Laboratory, Hamilton, Mt, USA 462 O. Péter Cependant, avec cette technique, les sera de bovins ont présenté de trop nombreuses réactions non-spécifiques. Par conséquent, nous n'avons pu tenir compte de ces résultats et nous avons réexa- miné une partie de ces sera (372) par microimmunofluorescence (Philip et ai, 1976) dès la dilution 1/16 (seuil de spécificité) avec un conjugué anti-IgG de bovins. Pour des raisons de statistique, nous avons tiré au hasard 100 sera parmi les 879 disponibles (25 sera de 4 districts, soit 2 districts du bas du canton, Neuchâtel (NE) et Boudry (BO), et 2 districts du haut du canton, Le Locle (LO) et La Chaux- de-Fonds (CF). Résultats 1. Micromammifères Au total 4 espèces de petits rongeurs ont été capturées: 26 Clethrionomys glareolus, 19 Apodemus sylvaticus, 23 A. flavicollis et 10 Mus musculus. Nous avons détecté des anticorps contre la «rickettsie suisse» dans 28,2% des cas (22 sur 78 rnicromamrnifères). Cependant, 86% des petits rongeurs forestiers présentant des anticorps provenaient d'au-dessous de 600 m et 7,3% d'une zone située entre 700 et 800 m. Au-dessus de 1000 m, aucun animal ne présentait plus d'anticorps (Tableau 1). Les sera des 10 souris grises (M. musculus) étaient tous négatifs. 2. Grands mammifères sauvages Nous avons constaté que 30,7% des chevreuils examinés (Capreolus capreolus) avaient des anticorps contre la «rickettsie suisse» (Tableau 2). Mais, de même que pour les rongeurs, nous observons chez ces animaux une diminution des anticorps en rapport avec l'altitude. La séparation est toutefois moins marquée mais reste tout de même évidente. Si nous choisissons une limite arbitraire, fixée à 1000 m, 20 chevreuils sur 45 abattus à des altitudes inférieures possèdent des anticorps, alors qu'au-dessus de cette limite seuls 7 chevreuils sur 43 en possèdent. De plus, cette situation est confirmée par Tableau 1 Test sérologique (microagglutination) contre la «rickettsie suisse» sur les micromammi- fères du Canton de Neuchâtel. Espèces Altitudes Lieux Clethrionomys Apodemus Mus musculus Totaux % glareolus spp. Inf. 600 Bois de l'Hôpital 1/ 1* 7/ 7 - 8/ 8 1 »fi 11/14 J 86 Peseux 7/ 7 4/ 7 - Neuchâtel _ _ 0/ 4 0/ 4 St-Blaise - _ 0/ 6 0/ 6 700-800 Fontaines 1/ 3 1/12 - 2/15 1 73 1/26 J ' Coffrane 0/14 1/12 - Sup. 1000 La Brévine 0/ 1 0/ 4 - 0/ 5 Totaux 9/26 13/42 0/10 22/78 28,2 * sera positifs/ sera testés - pas d'animaux Rickettsies des mammifères neuchâtelois 463 Tableau 2 Test sérologique (microagglutination) contre la «rickettsie suisse» sur les chevreuils du Canton de Neuchâtel Districts Altitude inf. 1000 m sup. 1000 m Totau: 12/20* 1/ 3 13/23 6/16 1/ 6 7/22 1/ 2 0/ 1 1/ 3 1/ 6 4/27 5/33 0/ 1 0/ 3 0/ 4 - 1/ 3 1/ 3 Neuchâtel Boudry Val-de-Ruz Val-de-Travers Le Locle La Chaux-de-Fonds Totaux 20/45 (44,4%) 7/43 (16,3%) 27/88 (30,7%) (1/512) (1/32) Titres d'anticorps maximaux * sera positifs/sera testés Test de fréquence double: 20/45 # 7/43 a = 0,00546 limites admises 0,05 ou 0,01 Tableau 3 Test sérologique (microimmunofluorescence) contre la «rickettsie suisse» sur les bovins du Canton de Neuchâtel Districts Sera testés Sera positifs Neuchâtel Boudry Val-de-Ruz Val-de-Travers Le Locle La Chaux-de-Fonds 98 22 55 11 51 1 43 2 60 1 65 1 Totaux 372 38 (10,2%) les titres d'anticorps décelés. Ainsi, le titre maximal est de 1/512 au-dessous de 1000 m et de 1/32 seulement au-dessus. Quant aux autres animaux sauvages, nous les avons également étudiés en fonction de la même limite d'altitude. Sur les 14 sera de lièvres (Lepus europaeus) contrôlés, tous négatifs, seuls 4 provenaient de régions de basse altitude. D'autre part, 3 renards (Vulpes vulpes) sur 4 présentaient des anticorps. Le serum de l'un d'eux, capturé à Métiers (800 m) possédait un titre de 1/256 et celui des 2 autres, respectivement de La Côte-aux-Fées ( 1100 m) et de Roche Queune ( 1000 m), avaient un titre de 1 /16. Enfin, 1 sanglier (Sus scrofa) capturé à Travers (850 m), ainsi qu'une mar- tre (Martes martes) de La Côte-aux-Fées, ont présenté une réaction contre la «rickettsie suisse» (1/32). Ainsi, comme pour les chevreuils, une proportion plus forte d'animaux (2 sur 6) présentaient des anticorps au-dessous de 1000 m, alors que 3 sur 18 seulement étaient positifs au-dessus de cette limite. 464 O. Péter ì- '§> O OSJJ C-B euch Z T3 O ( -J * *—* \ t 1 \ D V O O U W ¦s o c e ta 3 — t/î u W B vin evr 4) l-i > O t. O j= O CO (J J s Rickettsies des mammifères neuchâtelois 465 3. Bovins Au total 372 bovins ont été testés par microimmunofluorescence et 38 individus (soit 10,2%) ont réagi positivement (Tableau 3). Trente-trois provenaient des districts de Neuchâtel (NE) et de Boudry (BO) dont les territoires sont presque entièrement si- tués au-dessous de 1000 m (Fig. I). Les 5 animaux positifs restants se répartissaient dans les 4 autres districts du canton. Parmi les 100 sera tirés au hasard, 14 ont présenté des anticorps spécifiques (Tableau 4). Si nous séparons les bovins en 2 populations, l'une établie au-dessous, l'autre au-dessus de 1000 m, la différence est alors évidente: 13/50 pour la première et 1/50 pour la deuxième. D'ailleurs le test statistique de fréquence double nous indique que a (le risque) est plus petit que 1/1000. Tableau 4 Test sérologique (microimmunofluorescence) contre la «rickettsie suisse» sur les bovins de 4 districts du Canton de Neuchâtel Nombre de Districts Altitude sera testes sera positifs Totaux* Neuchâtel Inférieure à 25 Boudry 1000 m 25 Le Locle Supérieure à 25 La Chaux-de-Fonds 1000 m 25 13/50 1/50 Totaux 100 14 * sera positifs/sera testés Test de fréquence double: 13/50 ¥° 1/50 a = 0,001 limites admises 0,05 ou 0,01 Tableau 5 Répartition des animaux à sérologie positive par rapport à l'altitude 1000 m dans le Can- ton de Neuchâtel Espèces Altitude inf. 1000 m sup. 1000 m Chevreuils Lièvres Micromammifères Autres mammifères sauvages Bovins 20/ 45* 0/ 4 22/ 73 2/ 2 13/ 50 11 43 0/ 10 0/ 5 3/ 8 1/ 50 Totaux 57/174(32,5%) 11/116(9,4%) * sera positifs/sera testés DDL = X2 crit. 1 = 3,84 Test du x2 altitude inf. 1000 m sup. 1000 m X2 = 19,73 pos. 57 11 neg. 117 105 466 O. Péter 4. Résultats globaux en fonction de l'altitude 1000 m Si nous appliquons cette séparation selon l'altitude à tous les sera des animaux sau- vages et domestiques examinés, nous obtenons la répartition présentée sur le tableau 5 et la figure 1. Au total, 57 animaux sur 174 (32,5%) du bas du canton possèdent des anti- corps contre la «rickettsie suisse», alors que, dans le haut, seuls 11 sur 116 en possèdent (9,5%). La différence entre les 2 populations animales est statistiquement significative (test de X2, DDL = 3,84, X2 obs. = 19,73). Discussion /. ricinus est une tique triphasique et télotrope. Son spectre d'hôtes est très large (mammifères, oiseaux et reptiles) (Aeschlimann, 1972). Tous les stades évolutifs, larves, nymphes et adultes, sont capables de transmettre la «rickettsie suisse» (Péter et al, 1981 ). De plus, partout où nous avons récolté cette espèce, nous l'avons trouvée infectée de rickettsies mais à des pourcentages variables. Dès lors nous pouvons admettre que les animaux exempts d'anticorps contre la «rickettsie suisse» ne sont que rarement en con- tact avec /. ricinus. C'est notamment le cas des quelques souris grises (M. musculus) examinées, toutes négatives (O sur 10), capturées dans une région où 86% (19 sur 22) des rongeurs forestiers possèdent des anticorps spécifiques contre la «rickettsie suisse». Cela signifie que tiques et hôtes ne fréquentent pas le même biotope. Le même facteur pourrait expliquer les résultats sérologiques fort différents obtenus dans les diverses populations animales vivant au-dessus et au-dessous de la limite de 1000 m d'altitude. Cette différence est particulièrement vraie pour les espèces sédentaires, rongeurs et bo- vins, malgré le petit nombre d'animaux examinés. Elle est toutefois moins marquée avec les grands mammifères sauvages dont les déplacements sont souvent importants. La tendance reste cependant la même: les titres d'anticorps sont élevés en basse altitude et dénoncent une population d'I. ricinus importante. Les petits rongeurs sont de bons indicateurs quant à la présence et à la densité d'I. ricinus infectés par la «rickettsie suisse» dans une région donnée. D'ailleurs, le haut pourcentage de micromammifères présentant des anticorps spécifiques en basse alti- tude n'est pas inhabituel. Dans une forêt du Plateau suisse proche (Staatswald, 450 m d'altitude) nous avons observé 79,7% (114 sur 143) de rongeurs sauvages immuns contre la «rickettsie suisse» (Péter et al, 1981). A l'heure actuelle, le seul réservoir connu de la «rickettsie suisse» est son vecteur, soit J. ricinus. Cependant, les mammifères qui possèdent des anticorps sont tous sus- ceptibles d'être une source d'infection et plus particulièrement les micromammifères. En effet, pour toutes les rickettsies du groupe de la fièvre pourprée, certains petits rongeurs sont des réservoirs suspectés ou confirmés (Burgdorfer et al, 1966; Rehàcek et al, 1972). Toutefois, pour la «rickettsie suisse», cette hypothèse mérite une confirma- tion par la voie expérimentale. Remerciements Je suis reconnaissant à M. le Prof. A. Aeschlimann, Directeur de l'Institut de Zoologie de Neu- châtel, et au Dr W. Burgdorfer, Head Epidemiology Branch of the Rocky Mountain Laboratories, Rickettsies des mammifères neuchâtelois 467 Hamilton, Montana (USA), de leurs commentaires et critiques lors de la préparation de ce manus- crit. M. W. Burgdorfer doit être remercié spécialement de m'avoir fourni l'antigène indispensable aux tests sérologiques. Je remercie également Mme J. Moret, de l'Institut de Mathématiques de Neuchâtel, de son aide pour les tests statistiques, ainsi que le Dr J. C. Pedroli, Inspecteur de la Chasse et de la Pêche, le Dr J. Staehli, à l'époque Vétérinaire cantonal, les chasseurs du Canton de Neuchâtel et le personnel de l'Office Vétérinaire Cantonal de leur étroite collaboration pour la récolte d'échantillons de sang. Résumé Au cours de l'étude de l'écologie de la «rickettsie suisse», une rickettsie du groupe de la fièvre pourprée transmise par Ixodes ricinus, nous avons entrepris d'examiner le serum d'animaux domes- tiques et sauvages du Canton de Neuchâtel pour déceler la présence d'anticorps contre ce micro- organisme. L'ensemble des sera a été testé par microagglutination ou par microimmunofluorescence. Au vu des résultats, nous pouvons affirmer qu'un très large éventail d'hôtes est en contact avec des tiques infectées. Cependant, nous montrons que la répartition des animaux à sérologie positive n'est pas uniforme. En effet, si nous séparons l'ensemble des animaux examinés en 2 populations, l'une établie au-dessous de 1000 m d'altitude et l'autre en dessus on remarque que respectivement 32,5¾ et 9,5% des sera recueillis ont des anticorps. La séparation est très nette pour les animaux sédentaires (bovins et micromammifères) ce qui correspond à la distribution attendue de la tique /. ricinus. Zusammenfassung Im Verlauf von Studien zur Ökologie der «Rickettsie suisse», einem provisorisch so benannten, durch Ixodes ricinus übertragenen Erreger aus der Fleckfieber-Gruppe, wurden Seren von Haus- und Wildtieren aus dem Kanton Neuenburg untersucht, um Antikörper gegen diesen Mikroorganismus nachzuweisen. Verwendet wurden die Techniken der Mikroagglutination und der Mikroimmuno- fluoreszenz. Die erhaltenen Resultate bestätigen, dass ein grosses Spektrum von Wirten im Kontakt mit infizierten Zecken gewesen, jedoch die Verteilung der serologisch positiv Reagierenden nicht ein- heitlich ist. Wenn man die Gesamtmenge der untersuchten Tiere in zwei Populationen einteilt - unter und über 1000 m Höhe-, so enthalten jeweils 32,5% und 9,5% der gesammelten Seren Antikörper. Die Trennung ist besonders offensichtlich bei den «sesshaften» Tieren (Rinder und Kleinsäuger), was dem erwarteten Vorkommen der Zecke /. ricinus entspricht. Riassunto Nel corso dello studio dell'ecologia della «rickettsie suisse» per una rickettsia del gruppo della febbre purpurea trasmessa daü'Ixodes ricinus, abbiamo cercato di esaminare il siero degli animali do- mestici e selvatici del Cantone di Neuchâtel per scoprire la presenza di anticorpi contro questo mi- croorganismo. L'insieme dei sieri è stato controllato per microagglutinazione o per microimmuno- fluorescenza. Dai risultati ottenuti possiamo affermare che un elevato ventaglio di ospiti è in contatto con le zecche infette. Tuttavia dimostriamo che la ripartizione degli animali sieropositivi non è uni- forme. In effetti, se separiamo gli animali esaminati in due popolazioni, una situata sotto i 1000 metri di altitudine e l'altra al di sopra, si constata che il 32,5% ed il 9,5% dei sieri contiene anticorpi. La sepa- razione è molto netta per gli animali sedentari (bovini e micromammiferi), ciò che corrisponde alla constatata presenza della zecca Ixodes ricinus. Summary In the course of studying the ecology of the «Swiss Agent», which is the name given provisionally to a spotted fever group rickettsia transmitted by Ixodes ricinus, we have undertaken an examination of the serum of both domestic and wild animals in the Canton of Neuchâtel in order to ascertain the presence of antibodies against this microorganism. AU the sera were tested by microagglutination or microimmunofluorescence. The results enable us to affirm that there is a very broad spectrum of hosts 468 O. Péto- in contact with infected ticks, but we also show that the distribution of the animals with a positive se- rological reaction is not uniform. Indeed, if all the animals examined are separated into 2 populations, the one living below and the other above 1000 m above sea-level, it is seen that the percentages of the collected sera containing antibodies are 32-5% and 9-5% respectively. The separation is particularly clear among «sedentary» animals (cattle and small mammals), an observation corresponding with the expected distribution of the I. ricimo tick. Bibliographie Aeschiimann A. : Ixodes ricinus L. Essai préliminaire de synthèse sur la biologie de cette espèce en Suisse. Acta trop. 29, 321-340 (1972). -Aeschiimann A., Burgdorfer W., Matite H., Péter O. et Wyler R.: Aspects nouveaux du rôle de vecteur joué par Ixodes ricinus L. en Suisse. Acta trop. 36, 181-191 (1979). - Burgdorfer W., Friedhoff K T. and Lancaster Jr. J. 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Troger), 317-322, Graz 1976. - GiroudP., Capponi M., DumasN. etRageauJ.: Les Ixodes ricinus et hexagonus de France contiennent des agents rickettsiens ou proches. Compt. rend. Acad. Sci., Paris 260, 4874-4876(1965).- GiroudP., Capponi M., Dumas N., Colas-BelcourJ. et Musson R.: Mise en évidence d'une façon presque constante sur des tiques de l'Est de la France de l'antigène du groupe boutonneux pourpré et isolement de souches. Compt. Rend. Acad. Sci., Paris 255, 611-612 ( 1962). - Jadin J. et Giroud P. : Présence de rickettsies chez Ixodes ricinus en Belgique. Manuscrit non publié, 1-7, (1966). - Péter O., Burgdorfer W. et Aeschiimann A.: Enquête épidémiologique dans un foyer naturel de rickettsies à Ixodes ricinus du Plateau suisse. Ann. parasitol. 56, 1-8 (1981). - Philip R. N., Casper E. A., Ormsbee R. A., Peacock M. G. and Burgdorfer W. : Microimmunofluorescence test for the serological study of Rocky Mountain spotted fever and typhus. J. clin. 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Registration du manuscrit: 30 octobre 1984 ANNALES DE PARASITOLOGY HUMAINE ET COMPARÉE CK U °-/U- Tome 56 1981 N° 1 (E) Masson, Paris. 1981. Annales de Parasitologie (Paris) 1981, t. 56, n° 1, pp. 1-8 MÉMOIRES ORIGINAUX Enquête épidémiologique dans un foyer naturel de Rickettsies à Ixodes ricinus du plateau suisse (1) par O. PETER*, W. BURGDORFER ** et A. AESCHUMANN * 'Institut de Zoologie, Chantemerle 22, CH-2000 Neuchâtel. ** Epidemiology Branch, Rocky Mountain Laboratories, Hamilton, Montana 59840, U.S.A. RESUME. Dans une forêt de plaine humide du Plateau suisse, une Rickettsie du groupe de la fièvre pourprée, appelée par commodité « Rickettsie suisse », a été trouvée dans 8,5 % des tiques de l'espèce Ixodes ricinus. L'évolution de ce microorganisme dans les tiques a été étudiée. Quatre cent trente-trois descendants de la première génération, provenant de 17 ?? infectées, ont été testés. Tous les descendants, quel que soit leur stade évolutif (larve, nymphe, adulte), se sont révélés être infectés. La transmission transovarienne et transstadiale a donc eu lieu dans le 100 % des cas. Cent-soixante-huit micromammifères ont été capturés dans cette même forêt, soit 127 Clethrionomys glareolus, 29 Apodemus sylvaticus et flavicolis, 7 Microtus agrestis et 5 Sorex araneus. Tous étaient lourdement infestés par les larves d'I. ricinus (3 612 larves récoltées). Un échantillonnage de 143 sera, provenant des 5 espèces de micromammifères capturés, ont été testés par microagglutination avec un antigène spé- cifique anti-« Rickettsie suisse» : 114 d'entre eux (82 %) présentaient des anticorps contre cette Rickettsie. Epidemiological survey in a natural focus of Rickettsia transmitted by Ixodes ricinus in Switzerland. SUMMARY. A spotted fever group Rickettsia referred to as « Swiss agent » was detected in 8.5 % of Ixodes ricinus collected in a marshy forest of the Swiss plateau. (1) Ce travail, réalisé avec l'aide du Fonds National Suisse de la Recherche Scientifique (Requête n° 3.303.78), présente des résultats qui feront partie de la thèse du premier des auteurs. Accepté le 21 juillet 1980. 2 O. PETER ET COLLABORATEURS This organism, in its tick vector, was found to be transmitted stadially as well as ovarially ; of 433 larval, nymphal or adult ticks from 17 parental tick females, all were infected. A total of 3,612 larval I. ricinus were collected from 168 small mammals including 127 Clethrionomys glareolus, 29 Apodemus sylvaticus and flavicolis, 7 Microtus agrestis, and 5 Sorex araneus from the same forest. 143 sera were obtained from these rodents : 114 (82 %) had microagglutinating antibodies to the « Swiss agent ». I - Introduction Récemment, à l'instar d'auteurs allemands, autrichiens, tchécoslovaques et français, travaillant chacun dans leur pays respectif (Liebisch, 1976 ; Liebisch et al., 1978 ; Kaaserer et al, 1976 ; Bazlikova et al, 1977 ; Rehacek et al, 1971, 1977 ; Gilot, 1975), nous avons pu mettre en évidence la présence en Suisse d'une rickettsie dans la tique Ixodes ricinus (Aeschlimann et al, 1979 ; Burgdorfer et al, 1979). Les premiers essais d'identification montrent que cette « Rickettsie suisse » ( = Rs) (2) s'apparente au groupe de la fièvre pourprée. Elle est cependant différente des autres espèces décrites jusqu'à présent en Europe, soit R. conorii, R. sibirica et R. slovaca. Des recherches plus approfondies sont actuellement en cours pour préciser son statut systématique définitif. La Rs a été isolée pour la première fois au lieu-dit « Staatswald » (coordonnées : 575-576/203-204, carte de Suisse au 1/25 000, feuille Murten n° 1165), une forêt de plaine humide, à sous-bois broussailleux, située dans la région du Grand Marais à environ 15 km au sud-est de Neuchâtel (ait. 433 m). Après avoir contrôlé le taux de tiques infectées, nous avons effectué une étude sérologique pour connaître l'impor- tance de la circulation de cette rickettsie parmi les populations de micromammifères. Ce sont les résultats de cette enquête que nous publions ici. II - Matériel et méthodes 1 - Récolte du matériel. Les travaux ont été menés durant l'année 1979. D'avril à septembre, les tiques ont été récoltées au « drapeau » dans Ia forêt du Staatswald, puis placées jusqu'à leur examen dans un bac à température ambiante où l'humidité relative est maintenue à environ 95 %. De mi-mars à fin septembre, dans cette même forêt, nous avons capturé des micromammifères que nous avons transférés dans de petites cages grillagées, elles- (2) Dans la littérature anglaise, la Rs est désignée sous le nom de « Swiss agent ». RICKETTSIES A IXODES RICINUS 3 memes enfermées dans des sacs de toile. Les micromammifères sont ainsi gardés pendant 5 à 7 jours. Deux fois par jour, les tiques gorgées sont récoltées au fond des sacs. Toutes les tiques d'un animal sont maintenues séparées dans des tubes jusqu'à la mue. La détermination de l'Arthropode est ainsi plus aisée, de même que la confection des tests pour la présence de rickettsies. D'autre part, des échantillons de sang de chaque micromammifère sont prélevés du sinus orbital. 2 • Travaux de laboratoire. Toutes les tiques adultes récoltées sur la végétation ont subi le test de l'hémo- lymphe (Burgdorfer, 1970). Les frottis sont colorés par la technique de Giménez (1964). Chaque femelle trouvée infectée est nourrie sur un cobaye ou un lapin. Les tiques des deux sexes — les femelles après la ponte seulement — sont ensuite disséquées et des frottis d'hypoderme et de tubes de Malpighi colorés au Giménez ou préparés pour une étude en immunofluorescence (IF). Les nymphes sont écrasées individuellement sur des lames et les frottis colorés au Giménez. La transmission transovarienne et transstadiale des rickettsies a également été étudiée. Une partie des larves (F1) provenant de plusieurs femelles positives ont été écrasées individuellement sur des lames et les tissus préparés pour les réactions en IF. Les larves restantes ont été nourries sur des souris blanches. Pour la transmission transstadiale, on a recherché les rickettsies dans les frottis de tissus de nymphes et d'adultes descendant de femelles infectées. Les lots de nymphes et d'adultes ont été nourris sur le lapin. Toutes les réactions d'IF directe ont été réalisées avec un conjugué spécifique [immun-sérum de Microtus pennsylvanicus anti Rs marqué à l'isothiocyanate de fluo- resceine (3)], selon la technique décrite par Burgdorfer et Lackman (1960). Pour la sérologie, nous avons utilisé le test de microagglutination (Fiset et al., 1969), avec un antigène préparé à partir d'une souche de Rs (3) et un antigène de Coxiella burnetii (souche Ohio) (3). Les titres égaux à 1/8, ou plus grands, ont été considérés comme spécifiques. III - Résultats Infection des tiques. Sur un total de 2 217 Ixodes ricinus récoltés au « Staatswald » (1 673 adultes et 544 nymphes), 188 présentaient des rickettsies (147 adultes et 41 nymphes), soit 8,5 % (Tableau I). Les transmissions transovarienne et transstadiale ont réussi dans le 100 % des cas. En effet, 433 descendants de 17 femelles infestées ont été testés, soit 191 larves (transmission transovarienne), 113 nymphes et 129 adultes (transmission transstadiale). Tous les descendants examinés étaient infectés (Tableau II). (3) Préparé au Rocky Mountain Laboratory, Hamilton, U.S.A. 4 O. PETER ET COLLABORATEURS Tableau I. Présence de la «Rickettsie suisse» dans les tiques I. ricinus capturées sur la végétation Adultes : résultats basés sur d'étude des tests d'hémolymphes Nymphes : résultats basés sur l'étude de frottis de tissus de nymphes année Nombre de tiques examinées Nombre de tiques infestées % 1978 1979 1324 adultes 520 nymphes 349 adultes 24 nymphes 115 adultes 38 nymphes 32 adultes 3 nymphes 8,3 9,4 Total 2217 188 8,5 Tableau II. Transmissions transovarienne et transstadiale de la «Rickettsie suisse» par Ixodes ricinus Descendance de 17 ¥ ï Nombre de descendants examinés et trouvés infestés Transmission Transmission Transmission Transmission (groupée par lots) transovarienne transstadiale transstadiale transovarienne (larves —»nymphes) (nymphes—»adultes) o* ¥ totaux Wt 1: 4 ï î 134 descendants 80/80 54/54 pas étudié 134/134 Lot 2: 5 ? î 130 descendants 111/111 19/19 pas étudié 130/130 Lot 3: 2 ¥ ¥ 71 descendants pas étudié 9/9 21/21 41/41 71/71 Lot 4: 4 ? ? 41 descendants pas étudié 27/27 8/8 6/6 41/41 LOt 5. 2 î ¥ 57 descendants pas étudié 4/4 14/14 39/39 57/57 Totaux : 433 descendants 191/191 113/113 43/43 86/86 433/433 Les micromammifères. L'ensemble des animaux capturés (168 individus) ont produit 3 612 larves et 77 nymphes gorgées de l'espèce Ixodes ricinus (Tableau III) et quelques rares /. irianguliceps dont nous ne tiendrons pas compte dans ce travail. Quelques Sorex araneus, trouvés morts dans les pièges, ont subi un déparasitage manuel sous la loupe binoculaire. Quant aux autres micromammifères, ils ont libéré naturellement leurs tiques. RICKETTSIES A IXODES RICINUS 5 Tableau III. Nombre d'immatures d'i. ricinus fixés sur différentes espèces de micromammifères Nombre de micromammifêres Nombre de larves fixées Nombre de nymphes fixées Nombre moyen de larves / animal Clethrionomys glareolus : 127 Apodemus sp. : 29 Microtus agrestis : 7 Sorex anareus : 5 2792 635 113 72 58 14 5 0 22.0 22.0 16.1 14.4 Totaux : 168 3612 77 21.5 Nous avons étudié, dans le détail, le nombre de tiques qui s'étaient nourries sur les campagnols roussâtres (Clethrionomys glareolus), en classant les hôtes selon l'âge et le sexe après chaque récolte mensuelle. Les animaux juvéniles ont été séparés des adultes par le critère du poids, la limite ayant été fixée par l'observation à 19 g (Tableau IV). La technique de microagglutination a révélé que 77 Cl. glareolus sur 102 testés (75,5 %) )présentaient des anticorps spécifiques contre la Rs avec des titres variant de 1/8 à 1/1 024 (Tableau V). Si l'on ne tient compte que des adultes, 52 animaux sur 57 (91,2 %) ont été en contact avec la Rs. Sur 34 Apodemus sylvaticus et flavicolis récoltés, 30 présentaient des anticorps (88,2 %), avec des titres variant de 1/8 à 1/1 024. Des anticorps ont également été trouvés dans 6 Microtus agrestis et 1 Sorex araneus. Soulignons que sur l'ensemble des micromammifères examinés, seul un Apodemus sylvaticus présentait un titre d'anticorps de 1/8 contre Coxiella burnetii. IV - Discussion Dans la forêt du « Staatswald », le taux d'infection d7. ricinus par la Rs varie de 7 à 11 %. Ce chiffre est nettement inférieur à celui trouvé en Bulgarie (Georgieva et al., 1976) où 42 % d7. ricinus étaient infectés par une rickettsie du groupe de la fièvre pourprée. La présence de rickettsies de ce groupe chez /. ricinus a par ailleurs été mise en évidence dans plusieurs autres pays d'Europe : France, Allemagne, Autri- che, Tchécoslovaquie. La Suisse ne fait donc pas exception. Burgdorfer et Brinton (1975) ont montré que les transmissions transovarienne et transstadiaile ont lieu dans 100 % des cas avec Dermacentor andersoni infecté de R. rickettsii. Nous avons obtenu les mêmes résultats avec la Rickettsie suisse. 6 O. PETER ET COLLABORATEURS I I c T 1) 3 >> cu O bû e § j- — en O v(U .. 5 c M V) CU ¦- J- <» 3 3 » u £ SP r ¦5 ë-a fìlI ÎIH ac 3 C 1 eu E- § 3 M S- ti in CO CN . -P G rH -tf O) CO O (N rH Cl rH •-* CM m r— VO C O O^ r~ r* rH ^H "-* §2 O M (N H VO Ul P <-t O O) J O M i/l Kl (N J-I ?H t T (D r- HJ m rH m rH 0 W J-I O (N CO CO r-H en U Z rH rH r-1 ¦* CTi r*- 1) CTi S-« ¦p ja a> g (0 Cl) rH CU >0J CO C rH -P -P C S-I -H -H -H Uj 0 C (d (0 P 3